熒光顯微鏡是以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。
熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。 細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
熒光顯微鏡的使用:
1、將材料片放在顯微鏡的載物臺(tái)上。
2、打開熒光顯微鏡穩(wěn)壓器,然后啟動(dòng)紫外燈,紫外燈15min內(nèi)不得關(guān)閉,關(guān)閉后3min內(nèi)不得再啟動(dòng)。
3、將激發(fā)濾光片轉(zhuǎn)至v,分色片調(diào)到v,選用495或475nm阻擋濾光片。
4、選用uvFL40、uvFL100熒光接物鏡鏡檢。
5、在玻片上加無(wú)熒光油,先用40 x,再用100 x調(diào)焦鏡檢.呈現(xiàn)熒光。
6、因熒光物質(zhì)受紫外光照射時(shí)隨時(shí)間的增長(zhǎng)熒光逐漸變?nèi)?,因此鏡檢時(shí)應(yīng)經(jīng)常變換視野。
7、亦可用uvFL10或uvFL20低倍鏡鏡檢材料(用低倍鏡時(shí)不加無(wú)熒光油)。