倒置熒光顯微鏡,是指與一般顯微鏡相比,其物鏡、聚光鏡和光源的位置都顛倒過來,由熒光附件與顯微鏡有機(jī)結(jié)合構(gòu)成的顯微鏡。
倒置熒光顯微鏡成像原理介紹:
激發(fā)光從物鏡向下落射到標(biāo)本表面,被反射到物鏡中并聚集在樣品上,樣品所產(chǎn)生的熒光以及由物鏡透鏡表面、蓋玻片表面反射的激發(fā)光同時(shí)進(jìn)入物鏡,經(jīng)雙色束分離器使激發(fā)光和熒光分開而成像。物鏡和聚光鏡的工作距離很長(zhǎng),能直接對(duì)培養(yǎng)皿中的被檢物體進(jìn)行顯微觀察和研究。適用于土壤微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),具有在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)進(jìn)行顯微觀察的特點(diǎn),可以觀察不經(jīng)染色的透明活體。特別適用于對(duì)活體細(xì)胞和細(xì)胞離體培養(yǎng)等顯微觀察。
倒置熒光顯微鏡功能特點(diǎn):
(1)提供足夠能量的能激發(fā)出熒光的光源。
(2)有著適應(yīng)不同物質(zhì)所需的激發(fā)光譜一組濾色片,從光源中選擇合適的激發(fā)光譜,使析出的光譜與該物質(zhì)的吸收光譜重合,以期望獲得大的熒光。
(3)為獲得較弱的熒光圖像,還要建立一套截止濾色片,它使所需觀察的熒光進(jìn)入系統(tǒng)成像,而將其余的光波,包括發(fā)射光阻擋在外,用來提高圖像的襯度。
(4)放大的光學(xué)系統(tǒng)應(yīng)適應(yīng)熒光的特性,終獲得既能觀察又能攝影的高亮度、高分辨力的良好襯度 的熒光圖像。
(5)照明方式通常為落射式,即光源通過物鏡投射于樣品上。
(6)光源為紫外光,波長(zhǎng)較短,分辨力高于普通顯微鏡。