熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光素染色過的被檢物體,使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長波長的熒光,然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應(yīng)用于生物,醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。
熒光顯微鏡的正確使用方法:
1.右手握住熒光顯微鏡鏡臂,左手托住鏡座。
2.把熒光顯微鏡放在實驗臺上,略偏左(顯微鏡放在距實驗臺邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。
3.轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔(物鏡的前端與載物臺要保持2厘米的距離)。
4.把一個較大的光圈對準(zhǔn)通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)(右眼睜開,同時畫圖)。轉(zhuǎn)動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過目鏡,可以看到白亮的視野。
5.把所要觀察的玻片標(biāo)本(也可以用印有“6”字的薄紙片制成)放在載物臺上,用壓片夾壓住,標(biāo)本要正對通光孔的中心。
6.轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止(眼睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標(biāo)本)。
7.左眼向目鏡內(nèi)看,同時反方向轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
注意事項:
1、激發(fā)光長時間的照射,會發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象,因此盡可能縮短觀察時間,暫時不觀察時,應(yīng)用擋板遮蓋激發(fā)光。
2、作油鏡觀察時,應(yīng)用"無熒光油"。
3、熒光幾乎都較弱,應(yīng)在較暗的室內(nèi)進(jìn)行。
4、電源裝穩(wěn)壓器,否則電壓不穩(wěn)不僅會降低汞燈的壽命,也會影響鏡檢的效果。目前許多新興生物研究領(lǐng)域應(yīng)用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交(FISH)等等。