Quality is life, service is the tenet
?。?)嚴(yán)格按照熒光顯微鏡廠家說明書要求進(jìn)行操作,不要隨意改變程序。
?。?) 觀察對象必須是可自發(fā)熒光或已被熒光染料染色的標(biāo)本。
?。?)應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后,接上電源,點燃超高壓汞燈5~15min,待光源發(fā)出強光穩(wěn)定后,眼睛*適應(yīng)暗室,再開始觀察標(biāo)本。
?。?)載玻片、蓋玻片及鏡油應(yīng)不含自發(fā)熒光雜質(zhì),載玻片的厚度應(yīng)在0.8~1.2mm之間,太厚可吸收較多的光,并且不能使激發(fā)光在標(biāo)本平面上聚焦。載玻片必須光潔,厚度均勻,無油漬或劃痕。蓋玻片厚度應(yīng)在0.17mm左右。
?。?) 熒光幾乎都較弱,應(yīng)在較暗的室內(nèi)進(jìn)行。
?。?)防止紫外線對眼睛的損害,在調(diào)整光源時應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。
?。?)選用效果的濾光片組。
?。?)檢查時間每次以1~2h為宜,超過90min,超高壓汞燈發(fā)光強度逐漸下降,熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后,熒光也明顯減弱;所以,zui多不得超過2~3h。
?。?)熒光標(biāo)本一般不能長久保存,若持續(xù)長時間照射(尤其是紫外線)易很快褪色。因此,如有條件則應(yīng)先照相存檔,再仔細(xì)觀察標(biāo)本。
?。?0)熒光顯微鏡光源壽命有限,啟動高壓汞燈后,不得在15min內(nèi)將其關(guān)閉,一經(jīng)關(guān)閉,必須待汞燈冷卻后方可再開啟。嚴(yán)禁頻繁開閉,否則,會大大降低汞燈的壽命。標(biāo)本應(yīng)集中檢查,以節(jié)省時間,保護(hù)光源。天熱時,應(yīng)加電扇散熱降溫,新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時,須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點燃光源。
?。?1)標(biāo)本染色后立即觀察,因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延緩熒光減弱時間,防止封裱劑蒸發(fā)。
?。?2)若暫不觀察標(biāo)本時,可拉過阻光光簾阻擋光線。這樣,既可避免對標(biāo)本不必要的長時間照射,又減少了開閉汞燈的頻率和次數(shù)。
(13)熒光亮度的判斷標(biāo)準(zhǔn):一般分為四級,即“一”—無或可見微弱熒光。“+”—僅能見明確可見的熒光。“++”—可見有明亮的熒光。“+++”—可見耀眼的熒光。
(14)較長時間觀察熒光標(biāo)本時,一定要戴能阻擋紫外光的護(hù)目鏡,加強對眼睛的保護(hù)。在未加入阻斷濾光片前不要用眼直接觀察,否則會損傷眼睛。
(15) 激發(fā)光長時間的照射,會發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象,因此盡可能縮短觀察時間,暫時不觀察時,應(yīng)用擋板遮蓋激發(fā)光。
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